SBC ceRNA芯片
環狀RNA(circRNA)在真核生物中廣泛存在的發現使轉錄家族又增加了重要一員,lncRNA研究也正如火如荼,復雜的轉錄、轉錄調控網絡研究如何走捷徑?SBC ceRNA芯片是一個全轉錄組+產品,不僅同時檢測circRNA、lncRNA等非編碼RNA和編碼蛋白的mRNA,并同時獲得circRNA、lncRNA功能預測結果,為進一步功能研究提供參考。circRNA、lncRNA作為競爭性內源RNA(ceRNA),競爭性結合miRNA,從而調控miRNA靶基因的表達,這樣的作用方式廣泛存在,ceRNA芯片也同樣是ceRNA研究的不二之選。
基因芯片作為一個成熟的技術平臺,二十幾年來被廣泛用于基因表達譜的檢測。對于lncRNA、circRNA基因表達譜檢測,基因芯片比RNA測序有許多重要且不可替代的優勢:
芯片利用寡核苷酸探針與目的基因堿基互補雜交、掃描獲得的熒光信號來檢測表達豐度。與RNA測序相比,芯片檢測的準確性受低豐度轉錄本的影響更小,更適合檢測整體表達豐度低的lncRNA、circRNA。由于提高測序深度會增加加工不完全RNA的檢出機率,提高測序深度可能引起可靠性的下降。
lncRNA不具有蛋白的翻譯起止位置,RNA測序對lncRNA轉錄本鑒定的可靠性要低于mRNA。而芯片探針較短可以進行特異性設計,檢測更特異。
circRNA具有特殊的環狀結構,但其線性序列和線性基因難以區分,需要單獨的去線性建庫才能利用RNA測序來檢測circRNA,不能同時檢測多種RNA。
芯片設計策略:
Human ceRNA芯片設計流程圖
探針設計策略:
芯片特點:
·circRNA探針設計在反向剪接位點,特異性強
·技術成熟、靈敏度高:芯片比測序更適合檢測表達量低的lncRNA、circRNA
·實驗周期短,數據分析方法成熟、快速
·收錄lncRNA、circRNA全面、可靠,并及時更新
·功能機制預測,為深入研究circRNA、lncRNA生物學功能提供參考,包括:
高保守lncRNA;lncRNA結合蛋白預測;lncRNA生物學功能預測;lncRNA亞細胞定位;疾病相關lncRNA預測;super enhancer lncRNA;enhancer lncRNA;疾病相關circRNA預測。
主要參數:
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