教學(xué)目的與要求：
了解植物種質(zhì)離體保存的類型與特點；了解超低溫保存的特點與方法；植物植物種質(zhì)低
溫保存的基本操作技術(shù)。
第一節(jié) 概 述
一、植物種質(zhì)資源低溫保存意義
防止資源滅絕
節(jié)約人力物力
便于交流
二、超低溫保存的概念
種質(zhì)資源低溫保存（cryopreservation）是由cryo和preservation組成，在英語中cryo為
一前綴，被解釋為低溫、冷、冰、霜之意。從詞義看，低溫所涉及的溫度范圍是不確定的。
習(xí)慣上，人們將－80oC以下的低溫稱為超低溫，干冰溫度（－70oC）稱為極低溫，低溫則
從4oC往下推（李廣武等，1998）。對植物而言，低溫常常是指那些比常溫稍低一些的溫
度。如果低溫超過細(xì)胞原生質(zhì)所能忍受的臨界溫度，就會致使植物細(xì)胞遭受凍害而死亡。如
甜橙樹發(fā)生凍害的臨界溫度通常在－6.5oC，枳殼通常在－20oC左右（沈德緒等，1986）。
目前常用的超低溫保存方法可分為兩類，即冷凍誘導(dǎo)保護(hù)性脫水的超低溫保存和玻璃化
處理的超低溫保存。在超低溫條件下，生物的代謝和衰老過程大大減慢，甚至完全停止，因
此可以長期保存植物材料。
三、超低溫保存的研究概況
1．超低溫保存技術(shù)的發(fā)展
2．用于離體超低溫保存的植物材料
3．超低溫保存的植物種類
超低溫保存已涉及到不同的植物種類，如野生及人工創(chuàng)造的谷類、豆類、薯類、油類、
糖類、纖維類、蔬菜類、果樹、樹木、藥用植物和藻類等。
第二節(jié) 植物材料超低溫凍存的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)
一、細(xì)胞內(nèi)外水的凍結(jié)狀態(tài)是細(xì)胞凍存技術(shù)的關(guān)鍵
植物細(xì)胞中含有大量的水分，約占細(xì)胞總重量的60～90％。細(xì)胞中的水是由游離水和
束縛水組成，其中游離水約占90％，很容易凍結(jié)。由于細(xì)胞內(nèi)含有復(fù)雜的化合物，細(xì)胞內(nèi)的溶液并不象純水那樣在0oC左右結(jié)冰。