聲光可調諧濾波器（AOTF）可以為共聚焦顯微鏡提供更加清晰的圖像、逐像素波長的靈敏性以及精確的控制。Gooch & Housego（G&H）的生命科學部門副總裁Lars Sandstr?m探討了聲光可調諧濾波將來的技術發展，以及如何進一步增強共聚焦顯微鏡在生命科學領域的多功能性。共聚焦顯微鏡，也稱為共聚焦激光掃描顯微鏡（CLSM），在生命科學領域已經應用了數十年。從眼科到神經科學，共聚焦顯微鏡支持拯救生命相關的診斷、治療和研究。如今，共聚焦顯微鏡的生物醫學應用越來越依賴于聲光可調濾波器（AOTF）。AOTF技術在精確控制、靈敏性和速度方面均有提升，增強了共聚焦顯微鏡的多功能性，從而進一步實現了科學創新。隨著對更高圖像清晰度和靈活性的需求增加，AOTF解決方案可能會變得更加復雜，并需要特定的綜合專業技術和功能。

AOTF在共聚焦顯微鏡中的運用與優勢

聲光（AO）器件在共聚焦顯微鏡中有很多運用。您可以在調制、功率控制、激光切換、激光耦合和分光中找到它們的身影。對于單個掃描頭來說，例如徠卡顯微系統的STELLARIS 8，聲光器件被廣泛運用于其中。在它們之中，AOTF更是明星產品，提供了多種優勢，包括：

徠卡STELLARIS 8掃描頭

更清晰的圖像

檢查活體組織的一個挑戰是在標本移動或著分子變化/損壞之前，足夠快速地獲取多光譜數據。AOTF的多功能性允許分析活細胞，這意味著科學家們就可以完整而又準確的監測動態細胞過程，而這是基于 AOTF 系統所允許的快速光強與波長切換功能。熒光漂白后恢復（FRAP）、熒光漂白損失（FLIP）和用戶定義的小標本區域（感興趣的ROI區域）等技術已經取得了很大進展。

逐像素波長和功率控制

顯微鏡專家可以保持高掃描速率，同時逐像素調整圖像。通過為每個波長和激光分配不同的光強來實現不同信號電平的平衡。AOTF的一個用途是選擇特定的激發波長并設置白光激光器的功率。此外AOTF還可以與激光多路復用技術相結合。AOTF通過選擇系統中的激光源并控制其強度來控制波長和光強。聲光效應允許快速并精確地控制傳輸和波長選擇。這樣AOTF就可用作激發光的濾波器，并且可以實現“動態”調整。這與傳統的介質帶通濾波器形成鮮明對比，任何調整都意味著需要購買新的濾波器，并且顯微鏡中可以安裝的濾波器數量始終存在限制。

環境穩定性

共聚焦系統中的AOTF實現了對多條激光線路進行靈敏、快速的電子調諧和強度控制，消除了由溫度或濕度變化引起的任何潛在頻率漂移。而這些對于傳統濾波轉臺/輪的機械調諧方案很難實現。

AOTF技術與指標

在AOTF中，射頻驅動器輸出的頻率作用于壓電換能器（通常是鈮酸鋰），從而產生聲波并耦合到聲光材料中，如二氧化碲(TeO2)。這就產生了一個衍射光柵，其中晶體的折射率隨驅動器提供頻率的變化而變化。當相干光束穿過晶體時，只有一窄帶的頻率滿足相位匹配條件，并且以未衍射光束不同的角度離開晶體，而這便形成了衍射光斑。晶體的幾何形狀對于獲得所需的性能至關重要。

大多數高端聲光器件都是按標準規格制造的，G&H是一家行業內領先的專業公司，提供廣泛的聲光可調諧濾波器，覆蓋從紫外到中紅外的波長，帶寬小于1nm。G&H的聲光可調諧系統包括電子控制、可配置驅動器，以提高操作人員的靈活性和反饋穩定系統。無論工作環境條件如何，均可以保持波長的穩定性。G&H還運用了一項獲得專利的旁瓣抑制技術，以提高頻譜純度。

至關重要的是，G&H是唯一一家自己生產優質二氧化碲(TeO2)晶體的光學系統開發商。這有助于保持一致性和可靠性，從而產生更加一致和可重復的AOTF產品。這種在G&H的美國工廠(符合ITAR標準)生長，拋光和制造晶體的能力確保了在行業內領先的地位。

下一代共聚焦顯微鏡的驅動力

從OEM客戶和最終用戶對共聚焦顯微鏡發展方向的反饋表明，多功能性是一個關鍵的要求。對單一系統內更大范圍可調諧波長的需求正在增長，提供靈敏性，以及更好的使用價值。G&H已經可以提供單個濾波器可直接覆蓋400-2400 nm的范圍(而不是通常需要的三個濾波器)，并且在實現驅動的靈敏性方面更進一步。

溫度效應的管理是另一個需要進一步創新的領域。AOTF對溫度變化非常敏感。為了克服這個問題，G&H驅動器的設計基于一個可以保持溫度的芯片，并且通過一個反饋系統調整輸出以保持溫度恒定，這個過程稱為波長鎖定。該集成系統還包含晶體結構、序列號等可訪問信息。

為了最大限度地發揮AOTF系統的潛力及其對用戶的好處，G&H在顯微鏡系統制造商設計下一代顯微鏡之初就開始與他們合作。這種協作方法使制造商能夠提高他們的顯微鏡和超連續源的性能。

總而言之，經驗已經證明了采用漸進式而不是革命性的方法來實現卓越的AOTF和驅動系統制造和集成的優勢。G&H將與顯微鏡行業攜手合作，不斷改進AOTF技術，以跟上生命科學和生物光子學應用的快速發展步伐。