通過檢測識別血液中生物標志物來篩查早期人類疾病是生命健康領域備受關注的重要研究方向之一。 當前,臨床上常用的經典分析技術,如酶聯免疫吸附試驗(ELISA),由于檢測靈敏度的限制通常很難檢測到低豐度蛋白質生物標志物;而近些年來興起的數字蛋白檢測方法(digital ELISA)雖然能夠有效檢測到飛摩爾濃度級別的蛋白,但是,該項技術的實施通常涉及到專業昂貴的大型儀器,多個洗滌步驟,并且缺乏并行化處理樣本的能力,這些因素阻礙了其廣泛應用。
近日,浙江大學良渚實驗室王永成研究員團隊開發了新一代離心生成液滴的數字蛋白檢測技術(CDPro),基于微通道陣列的微流控芯片,利用常規的離心機即能實現對多達數百個樣本同時快速液滴生成,同時實現微量血液中蛋白的超靈敏檢測。
該成果以“Highly Parallel, Wash-free, and Ultrasensitive Centrifugal Droplet Digital Protein Detection in Sub-Microliter Blood”為題,發表在英國皇家化學會期刊Lab on a Chip上,并入選為熱點文章(HOT Articles)。
圖1 離心液滴數字蛋白質檢測(CDPro)流程示意圖
研究團隊開發了新一代離心生成液滴的微流控芯片,在此基礎上開發了基于液滴的數字免疫PCR技術,即通過一對特異性抗體-寡核苷酸(antibody-oligo)捕獲靶標蛋白,繼而在DNA連接酶的作用下,將靶標蛋白檢測信號轉化為核酸檢測信號。結合離心式液滴微流控芯片和數字免疫PCR技術,實現針對微量血漿中特定蛋白標志物的飛摩爾靈敏度檢測極限。
綜上所述,CDPro技術不僅具備超高的檢測靈敏度和檢測準確性,而且擁有樣品處理通量高、操作過程簡單、免清洗、用血量少、成本低等特點及優勢,能夠提供給普通生物醫學實驗室進行科學研究,以及臨床上血漿中低豐度蛋白檢測分析。
責任編輯:彭菁
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原文標題:離心式液滴微流控+數字免疫PCR,檢測微量血液中的蛋白
文章出處:【微信號:Micro-Fluidics,微信公眾號:微流控】歡迎添加關注!文章轉載請注明出處。
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